Трихромды бояу - Trichrome staining

Трихромды бояу Бұл гистологиялық бояу екі немесе одан көп әдісті қолданатын әдіс қышқыл бояғыштар бірге полиацид. Бояу маталарды қарама-қарсы түстерге реңк беру арқылы ажыратады. Бұл жасушалардағы микроскопиялық ерекшеліктердің контрастын күшейтеді тіндер, оларды а арқылы қарау кезінде көруді жеңілдетеді микроскоп.

Сөз трихромды «үш түсті» дегенді білдіреді. «Трихром» деп сипатталған алғашқы бояу хаттамасы болды Маллоридің трихромды дақтары, ол әр түрлі боялған эритроциттер қызыл түске, бұлшықет тіні қызыл түске және коллаген көк түске дейін. Трихромды бояудың басқа протоколдары болып табылады Массонның трихромды дақтары, Лилидің трихромы, және Геморидің трихромды дақтары.

Мақсаты

Трихромды бояусыз, бір ерекшелігін екіншісінен ажырату өте қиын болады. Тегіс бұлшықет тіні мысалы, коллагеннен ажырату қиын. Трихромды дақ бұлшықет тінін қызыл түске, ал коллаген талшықтары жасыл немесе көк түске боялуы мүмкін. Бауыр биопсиясы бауыр жасушаларының арасында ұсақ коллаген талшықтары болуы мүмкін, ал коллагеннің мөлшерін бояу әдісі негізінде бағалауға болады. Қазір трихромды әдістер бұлшықеттерді коллагеннен, гипофиз альфа-жасушаларын бета-жасушалардан, фибринді коллагеннен, митохондрия мұздатылған бұлшықет секцияларында, басқа қосымшалармен қатар. Бұл коллагенді тіндердің жоғарылауын анықтауға көмектеседі (мысалы, фибротикалық өзгерістер) бауыр циррозы және бұлшықет жасушалары мен фибробласттардан пайда болатын ісіктерді ажырату.[1]

Процедура

Трихромды бояу техникасында екі немесе одан да көп қолданылады қышқыл бояғыштар. Әдетте қышқыл бояғыштар бірдей негізгі ақуыздарды бояйды, бірақ оларды дәйекті түрде қолдану арқылы бояу схемасын басқаруға болады. Полиацид (мысалы фосфолимдик қышқылы немесе вольфрамфосфор қышқылы ) бояуды таңдамалы түрде кетіру үшін қолданылады. Полиацидтер жоғары бояғыштар ретінде әрекет етеді деп ойлайды молекулалық салмақ: олар коллагеннен оңай кететін бояуды ығыстырады.

Әдетте сұйылтылған қызыл бояғыш сірке қышқылы бірінші кезекте барлық компоненттерді қалыпқа келтіру үшін қолданылады. Содан кейін коллагеннен және басқа компоненттерден қызыл бояуды ығыстыру арқылы кетіру үшін полиацид қолданылады. Сұйылтылған сірке қышқылындағы екінші қышқылдық бояғыш (көк немесе жасыл) қолданылады, ол өз кезегінде полиацидті ығыстырады, нәтижесінде коллаген бастапқы бояумен контрастын түске боялған. Егер эритроциттерді бояйтын болса, қызыл бояумен боялмас бұрын кішкене молекулалық массаға сары немесе сарғыш бояғыш жағылады. Әдетте оны 80% этанолдағы қаныққан ерітіндіден және көбінесе пикрин қышқылымен (өзі бояғыш) және полиацидпен бірге қолданады. Әдістер тіндердің бояғыштарға реакциясы, тығыздығы, қол жетімділігі және басқаларындағы аз айырмашылықтарды қолданады.

Бояғыштар мен полиацидті дәйекті түрде енгізетін трихромды дақтар деп аталады көп сатылы трихромдар. «Бір сатылы» әдістерде барлық бояғыштар - полиацидпен немесе онсыз - бір ерітіндіде біріктіріледі. Трихромды бояудың ежелгі тәсілдерінің бірі - бұлшықет пен дақтарға әсер ететін ван Гизон әдісі. цитоплазма сары, ал коллаген қызыл. Тағы бір Геморидің трихромды дақтары, бұл Массонның трихромын мұқият имитациялайды. «Yellowsolve» әдістерінде алдымен сұйылтылған сірке қышқылындағы қызыл бояу қолданылады, содан кейін бөлім ылғалдың қалмауын қамтамасыз ету үшін өте мұқият сусыздандырылады. Содан кейін қызыл бояғышты еріткіштегі сары бояумен ығыстырады, мысалы целлозолв (2-этокси-этанол). Аты сары еру - бұл терминдердің қоспасы сары және целлозды ерітеді. Лендрумның жасуша қосылуына арналған флоксин-тартразині - бұл сары түсті ертінді дақтың бір мысалы.

Бояғыштар

Трихромды бояуға қолданылатын бояғыштардың арасында:

Қызыл
Фуксин қышқылы, ксилидин понсо, хромотроп 2R, Қызыл-қызыл, ponceau 6R, флоксин
Көк және жасыл
Ашық жасыл SF сарғыш, Жылдам жасыл FCF, метил көк, су көк
Сары
Тұз қышқылы, қызғылт сары G, Мартиус сары, tartrazine, сары фрезерлеу

Сыртқы сілтемелер

Сондай-ақ қараңыз

Ескертулер

  1. ^ Ламар Джонс, М. «Арнайы дақтар туралы нұсқаулық». 10 тарау: Трихромды дақтарды игеру. Дако. Алынған 20 мамыр 2011.

Әдебиеттер тізімі

  • Бейкер Дж.Р. (1958) Биологиялық микротехниканың принциптері. Лондон: Метуан.
  • Хоробин RW (1982) Гистохимия. Штутгарт: Густав Фишер.
  • Horobin RW (1988) Гистохимияны түсіну. Чичестер: Эллис Хорвуд.
  • Kiernan JA (2008) Гистологиялық және гистохимиялық әдістер, 3-ші басылым. Блохэм: Scion.
  • Prento P (2009) Макромолекулаларды бояу: мүмкін механизмдер мен мысалдар. Биотехника. Гистохимия. 84: 139-158.
  • Пучтлер Н, Ислер Н (1958) Фосфомолибдик қышқылының дәнекер тіндердің әртүрлі бояғыштармен жағылуына әсері. Дж. Гистохим. Цитохим. 6: 265-270.
  • Reid PE, Iagallo M, Nehr S, Jankunis M, Morrow P (1993) Дәнекер тіндердің техникасы механизмі. 1. Анионды бояу процедураларына бояу концентрациясы мен бояу уақытының әсері. Гистохимия. Дж. 25: 821-829.