Шектеу ферменті арқылы интеграциялау - Restriction enzyme mediated integration

Шектеу ферменті арқылы интеграциялау (қысқартылған РЕМИ) интеграциялау әдісі ДНҚ (сызықты плазмида ) сол арқылы жасалған геномдық сайттарға рестрикциялық фермент ДНҚ-ны сызықтық күйге келтіру үшін қолданылады.[1] Плазмидалы интеграция сәйкес учаскелерде жүреді геном, көбінесе тану учаскелерін плазмидтік сызықтандыру үшін қолданылатын шектеу ферментімен қалпына келтіру арқылы.

Механизм

Ерекше рестрикт ферменті геномдық ДНҚ-ны кездейсоқ нүктелерде бөліп, тану орындарын тудырады.[2] Кірістірілетін ДНҚ фрагменті дәл сол рестрикменттік ферменттің көмегімен жасушаға енгізілген қоспаның және содан кейін ДНҚ фрагментінің сәтті енгізілуінің көмегімен сызықты болады.[3]

Қолданбалар

Генерациялау үшін REMI әдісі қолданылған генетикалық түрлендірілген организмдер оның ішінде Saccharomyces cerevisiae, Dictyostelium discoideum және Xenopus laevis.[1][4][5]

Геномдық инженерия

REMI кең ауқымда қолданылған трансгенезис жылы X. лаевис эмбриондарды, соның ішінде әр түрлі сигнал беру жолдарын зерттеу FGF және Қалқанша безі жүйе.[3][6]

Әдебиеттер тізімі

  1. ^ а б Шиестл, Р. Х .; Питес, Т.Д (1991-09-01). «Saccharomyces cerevisiae-дегі заңсыз рекомбинация жолымен ДНҚ фрагменттерінің интеграциясы». Америка Құрама Штаттарының Ұлттық Ғылым Академиясының еңбектері. 88 (17): 7585–7589. дои:10.1073 / pnas.88.17.7585. ISSN  0027-8424. PMC  52346. PMID  1881899.
  2. ^ Кесслер, С .; Манта, В. (1990-08-16). «Шектеу эндонуклеазаларының және ДНҚ модификациясының метилтрансферазаларының ерекшелігі (шолу 3)». Джин. 92 (1–2): 1–248. дои:10.1016 / 0378-1119 (90) 90486-б. ISSN  0378-1119. PMID  2172084.
  3. ^ а б Кролл, К.Л .; Амая, Е. (1996-10-01). «Сперматозоидтардың ядролық трансплантациясындағы трансгенді ксенопус эмбриондары гаструляция кезінде FGF сигнализациясының қажеттіліктерін анықтайды». Даму. 122 (10): 3173–3183. ISSN  0950-1991. PMID  8898230.
  4. ^ Куспа, А .; Loomis, W. F. (1992-09-15). «Диктиостелийдегі дамушы гендерді плазмидті ДНҚ-ны ферменттік-рестрикциялық интеграциялау арқылы белгілеу». Америка Құрама Штаттарының Ұлттық Ғылым Академиясының еңбектері. 89 (18): 8803–8807. дои:10.1073 / pnas.89.18.8803. ISSN  0027-8424. PMC  50009. PMID  1326764.
  5. ^ Торғай, Дункан Б .; Латинчич, Бранко; Мохун, Тим Дж. (2000-02-15). «Трансгенді Ксенопус генерациясының жеңілдетілген әдісі». Нуклеин қышқылдарын зерттеу. 28 (4): e12. дои:10.1093 / nar / 28.4.e12. ISSN  0305-1048. PMC  102591. PMID  10648800.
  6. ^ Турка, Натали; Палмье, Карима; Ле-Мевель, Себастиан; Аллиот, Каролайн; Деменикс, Барбара А. (2005-11-01). «Преметаморфты ксенопус таяқшаларында тиреоидты бұзатын агенттердің транскрипциялық әсерін сынауға арналған жедел, физиологиялық хаттама». Экологиялық денсаулық перспективалары. 113 (11): 1588–1593. дои:10.1289 / ehp.7992. ISSN  0091-6765. PMC  1310923. PMID  16263516.