Протеин Л. - Protein L

Ақуыз L b1 домені
Ақуыз L 1MHH.png
Ақуыздың құрылымы L фитофиттің жеңіл тізбегімен байланысуы.[1]
Идентификаторлар
ТаңбаPpL
PfamPF02246
InterProIPR003147
SCOP21MHH / Ауқымы / SUPFAM

Протеин Л. алдымен бактерия түрлерінің бетінен оқшауланған Peptostreptococcus magnus арқылы иммуноглобулиндерді байланыстыратыны анықталды L тізбегі аты ұсынылған өзара әрекеттесу.[2] Ол 719 аминқышқылының қалдықтарынан тұрады.[3] Ақуыздың молекулалық массасы жасуша қабырғасынан тазартылған Peptostreptoccus magnus алғаш рет қалпына келтіруші 2-меркаптоэтанолдың қатысуымен SDS-PAGE көмегімен 95кД деп бағаланған, ал молекулалық массасы 6 М гуанидин HCl қатысуымен гель-хромотография арқылы 76кД-ға дейін анықталған. Ақуыз L құрамында ешқандай дисульфидті тізбекаралық ілмектер жоқ, сонымен қатар дисульфидтермен байланысқан суббірліктерден тұрады. Бұл а. Бар қышқыл молекула pI 4.0-ден.[4] Айырмашылығы жоқ Ақуыз A және Протеин Г., иммуноглобулиндердің Fc аймағымен байланысады (антиденелер ), Ақуыз L антиденелерді байланыстырады жеңіл тізбек өзара әрекеттесу. Ауыр тізбектің ешқандай бөлігі байланыстырушы өзара әрекеттесуге қатыспайтындықтан, L протеині протеин А немесе G-ге қарағанда антидене кластарының кең спектрін байланыстырады, ақуыз L барлық антиденелер кластарының өкілдерімен байланысады, соның ішінде IgG, IgM, IgA, IgE және IgD. Бір тізбекті айнымалы фрагменттер (scFv ) және Fab фрагменттері ақуыз L-мен байланысады.

Байланыстырудың кең ауқымына қарамастан, L протеині антиденемен байланысатын әмбебап емес ақуыз. Ақуыздың L байланысуы каппа жеңіл тізбектері бар антиденелермен шектеледі. Адамдар мен тышқандарда антидене молекулаларының көпшілігінде каппа (κ) жеңіл тізбектері, ал қалған бөлігінде лямбда (λ) жеңіл тізбектері болады. Ақуыз L каппаның жеңіл тізбектерінің кейбір кіші түрлерін байланыстыру кезінде ғана тиімді. Мысалы, ол адамның VκI, VκIII және VκIV ішкі типтерін байланыстырады, бірақ VκII ішкі түрін байланыстырмайды. Тінтуірдің иммуноглобулиндерімен байланысуы тек VκI жеңіл тізбектерімен шектеледі.[5]

Тиімді байланыстырудың осы ерекше талаптарын ескере отырып, иммобилизденген L протеиніне арналған негізгі қолдану - тазарту моноклоналды антиденелер бастап асцит немесе жасуша мәдениеті супернатант бар екені белгілі каппа жеңіл тізбегі. Ақуыз L құрамында VLκ бар моноклоналды антиденелерді культура супернатантынан тазарту үшін өте пайдалы, өйткені ол байланыспайды. сиыр а) ретінде бұқаралық ақпарат құралдарында жиі кездесетін иммуноглобулиндер сарысу қосымша. Сондай-ақ, ақуыз L антидененің антигенмен байланысатын орнына кедергі жасамайды, бұл оны пайдалы етеді иммунопреципитация талдау, тіпті IgM қолдану арқылы.

L протеинінің гені

L протеинінің генінде бес компонент бар: 18 аминқышқылының сигналдық реттілігі; 79 қалдықтан тұратын NH2-терминал аймағы («А»); әрқайсысы 72-76 аминқышқылдарының бес гомологиялық «В» қайталануы; екі қосымша «С» қайталанатын COOH терминальды аймағы (әрқайсысында 52 амин қышқылы); гидрофильді, С қайталанғаннан кейін пролинге бай болжамды жасушалық қабырғаға созылатын аймақ («W»); гидрофобты мембраналық якорь («М»). B қайталануы (36кД) Ig жарық тізбектерімен өзара әрекеттесуге жауап беретіні анықталды.[2]

Басқа антиденелерді байланыстыратын ақуыздар

Протеин L-ден басқа, басқа иммуноглобулинмен байланысатын бактериалды белоктар Ақуыз A, Протеин Г. және Протеин A / G барлығы иммуноглобулиндерді тазарту, иммобилизациялау немесе анықтау үшін қолданылады. Осы иммуноглобулинді байланыстыратын ақуыздардың әрқайсысында антидененің белгілі бір бөлігі және ол байланысатын антиденелердің түрі мен типі бойынша әр түрлі антиденелерді байланыстыру профилі болады.

Әдебиеттер тізімі

  1. ^ Грейл М, Харрисон С, Крамп МП, Финдлоу СК, Хаусден Н.Г., Мюллер Б.Х., Баттаил-Пуаро Н, Сибаи Г, Саттон Б.Дж., Тауссиг МЖ, Джоливет-Рейно С, Гор МГ, Стура Е.А. (желтоқсан 2002). «Иммуноглобулиннің жеңіл тізбекті ақуызды L интерфейсіндегі пластикалық және құрылымдық мимриканың дәлелдері». J Biol Chem. 277 (49): 47500–6. дои:10.1074 / jbc.M206105200. PMID  12221088.
  2. ^ Бьорк Л (ақпан 1988). «Протеин L. - Ig L тізбектеріне жақындығы бар жаңа бактериялық жасушалық қабырға ақуызы». Дж. Иммунол. 140 (4): 1194–7. PMID  3125250.
  3. ^ Kastern W, Sjöbring U, Björck L (маусым 1992). «Пептострептококкты ақуыздың L құрылымы және қайталанатын иммуноглобулинді жеңіл тізбекті байланыстыратын аймақты анықтау». Дж.Биол. Хим. 267 (18): 12820–5. PMID  1618782.
  4. ^ Akerström B, Björck L (қараша 1989). «Ақуыз L: иммуноглобулинді жеңіл тізбекті байланыстыратын бактериялық ақуыз. Байланысты және физико-химиялық қасиеттерін сипаттау». Дж.Биол. Хим. 264 (33): 19740–6. PMID  2479638.
  5. ^ Nilson BH, Lögdberg L, Kastern W, Björck L, Akerström B (тамыз 1993). «Жеңіл тізбектің айнымалы аймағында ақуыздармен байланысатын құрылымдық құрылымдарды қолдана отырып антиденелерді тазарту». Дж. Иммунол. Әдістер. 164 (1): 33–40. дои:10.1016 / 0022-1759 (93) 90273-а. PMID  8360508.