Фотоактивті флуоресцентті ақуыз - Photoactivatable fluorescent protein
Фотоактивті флуоресцентті ақуыздар (PAFPs) жарық тудыратын химиялық реакция арқылы өзгертілуі мүмкін флуоресценцияны көрсетеді.
Тарих
Бірінші ЖЗҚ, Каеде (ақуыз), оқшауланған Трахифилия геофройы флуоресцентті ақуыздарды анықтауға арналған cDNA кітапханасының экранында.[1] Осы экраннан алынған люминесцентті жасыл протеин ультрафиолет сәулесіне сезімтал екендігі байқалды.
Біз бір түнде зертханалық орындықта ақуыз үлестерінің бірін қалдырдық. Келесі күні біз орындықтағы ақуыз сынамасының қызыл түске боялғанын, ал қағаз қорапта қалғандарының жасыл болып қалғанын анықтадық. Аспан жартылай бұлтты болғанымен, қызыл сынама оңтүстікке қараған терезелер арқылы күн сәулесінің әсерінен болды.[2]
Қасиеттері
Көптеген PAFP қолданыстағы флуоресцентті ақуыздардан жасалған немесе Каеданың ашылуынан кейін ауқымды экрандардан анықталған. Олардың көпшілігі жасыл-қызыл фотоконверсияға ұшырайды, бірақ басқа түстер бар. Кейбір ақуыздар қайтымсыз фотоконверсия реакцияларына қатысады, ал басқа реакцияларды белгілі бір толқын ұзындығының жарығын пайдаланып өзгертуге болады.
ЖЗҚ тізімі
| PAFP қасиеттері[3] | |||||||||
|---|---|---|---|---|---|---|---|---|---|
| PAFP | Сіңіру1 (нм) | Эмиссия1 (нм) | Сіңіру2 (нм) | Эмиссия2 (нм) | Фотоконверсиялық толқын ұзындығы | Қайтымдылық | Жарықтық1* | Жарықтық2* | Анықтама |
| Каеде (ақуыз) | 508 | 518 | 572 | 580 | ультрафиолет | жоқ | 2.64X | 0.60X | [4] |
| Eos (ақуыз) | 506 | 516 | 571 | 581 | ультрафиолет | жоқ | 1.30Х | 0.70X | [5] |
| IrisFP | 488 | 516 | 551 | 580 | ультрафиолет | жоқ | 0.66X | 0.49X | [6] |
| IrisFP | 488 | 516 | 390 | ? | 490 нм | қайтымды, 390 нм | ? | ? | idem |
| IrisFP | 551 | 580 | 440 | ? | 550 нм | қайтымды, 440 нм | ? | ? | idem |
| KikGR / Kikume | 507 | 517 | 583 | 593 | ультрафиолет | жоқ | 0.60X | 0.64X | [7] |
| Дронпа | 503 | 518 | 390 | ? | 490 нм | қайтымды, 390 нм | ? | ? | [8] |
| PAGFP | 400 | ? | 504 | 517 | ультрафиолет | жоқ | 0,08Х | 0.42X | [9] |
| PS-CFP | 402 | 468 | 490 | 511 | ультрафиолет | жоқ | 0.17X | 0.16X | [10] |
| KFP1 | ? | ? | 590 | 600 | жасыл | айнымалы | 0.004X | 0.13X | |
| * Жарықтық мәні EGFP-ге қатысты. | |||||||||
Қолданбалар
Басқа флуоресцентті ақуыздардан айырмашылығы, PAFP-ні таңдамалы оптикалық маркерлер ретінде пайдалануға болады. Жасушаның бөлінуін, миграциясы мен морфологиясын бағалау үшін толығымен таңбаланған жасушаны қадағалауға болады. Құрамында PAFP бар өте аз көлемді лазермен белсендіруге болады. Бұл жағдайларда ақуыз айналымын, диффузияны және айналымды бағалауға болады.
Әдебиеттер тізімі
- ^ Андо т.б. 2002 PNAS 99 (20) 12651-6 бет.
- ^ Андо және т.б. 2002 PNAS 99 (20) p 12652
- ^ Лукьянов т.б. 2005. Молекулалық жасуша биологиясының табиғаты туралы шолулар 6 (11) 885-91 бет.
- ^ Андо т.б. 2002 PNAS 99 (20) 12651-6 бет.
- ^ Виденманн т.б. 2004. PNAS 101 (45), 15905-10 бет.
- ^ Адам т.б. 2008. PNAS 105 (47), 18343–48 бб.
- ^ Цуцуй т.б. 2005. EMBO есептері 6 (3), 233-8 бб.
- ^ Хабучи т.б. 2005. PNAS 102 (27), 9511-6 бет.
- ^ Паттерсон және Липпинкотт-Шварц 2004 ж. Әдістер 32 (4), 445-50 беттер.
- ^ Чудаков т.б. 2004. Табиғи биотехнология 22 (11), 1435-9 бб.