Ноцепцияны талдау - Nociception assay

A ноцицептивті талдау (нозиоцепция немесе ноциоперцепцияны талдау) жануарлардың, әдетте кеміргіштердің, қоздырудан туындаған ауырсыну сезімі сияқты зиянды тітіркендіргішті анықтау қабілетін бағалайды ноцицепторлар. Бұл талдаулар ауырсынуды болдырмау, жалау, қимылсыздық және дауыс беру сияқты мінез-құлық арқылы өлшейді. Ауырсыну сезімі унитарлы ұғым емес; сондықтан зерттеуші ноцицептивтің қандай әдісін қолданатындығын білуі керек.

Формалин

The формалин талдау - ең танымал химиялық талдау ноцепция. Бұл а-ны енгізуге алып келеді сұйылтылған формалинді кеміргіштердің артқы бетінің бетіне ерітіндісі, содан кейін зақымдалған артқы лапты қылау, жалау және тістеу сияқты стереотиптік мінез-құлықты бағалау.[1] Мінез-құлық шамамен 1 сағатқа созылады, ерте немесе өткір ноцепторлардың тікелей активтенуін көрсететін кезең (инъекциядан кейін тікелей) және кеш немесе тоник фазасы (инъекциядан кейін 15-20 минуттан кейін) қабыну.[1] Әдетте формалинді талдау егеуқұйрықтарда қолданылады; дегенмен формалин концентрациясы мен скоринг әдісін тышқандарға сай етіп өзгертуге болады.[2] Қабыну ауруының басқа модельдеріне қарағанда формалинді талдаудың бір маңызды артықшылығы - жауаптың шектеулі ұзақтығы (шамамен 1 сағат).[2] Сонымен қатар, бұрын сипатталғандай, бұл талдау екі дискретті кезеңде жауап береді, бұл зерттеушілерге өткір және тоникалық ауырсынуды бір рет қолданып модельдеуге мүмкіндік береді. зиянды химиялық.

Қиындық

Витингтік сынау кезінде зерттелетін қосылыстың перифериялық ноцептивті белсенділігі сірке қышқылын ішілік интрапиральды инъекциядан туындаған құрсақ қуысы санымен анықталады.[3][4]

Фон Фрей

Фон Фрейдің талдауы, енгізген Максимилиан фон Фрей және Вайнштейн өзгерткен, қолданады Фон Фрейдің шашы немесе кеміргіштің механикалық тітіркендіргішке сезімталдығын тексеру үшін ұзындығы шамамен 50 мм және диаметрі әртүрлі нейлон таяқшасының кішкене бөліктері болып табылатын талшықтар.[1] Процестің шынымен қарастырылатын-қаралмағаны түсініксіз зиянды жай тітіркендіргішке қарсы, сондықтан бұл талдау механикалық тест болып табылады ноцепция немесе жай механикалық сезімталдық. Бұл сынақта жануар биік торлы платформада тұрады, ал Фон Фрейдің шаштары тордың ішіне жануардың артқы аяғын соғу үшін салынған.[2] Жануарлар үшін қалыпты реакцияларға лапты алып тастау немесе жалау немесе шайқау, мүмкін дауыстау жатады, бірақ бұл тәжірибедегі өзгергіштікке байланысты болуы мүмкін. Мысалы, тарсал артқы табанның беткі жағы, әдетте, төменгі деңгеймен салыстырылады доральды талшықтың дәл күші оның қалыңдығымен анықталады.[2] Сонымен қатар, бірнеше рет өткізілген сынақтар кезінде шектер бастапқыда азаяды, бірақ шамамен 3 сеанстан кейін тұрақты болатындығын ескеру қажет. Алгоритмдер жоғары-төмен немесе Бруцетонды талдау тестілеуді диапазонның ең динамикалық бөлігіне шоғырландыру үшін қол жетімді, содан кейін қисық сызықтар мен параметрлерді бағалау дәл осылай стандартталған болуы мүмкін.[5] Сонымен қатар, автоматтандырылған Жақында фон Фрей жүйелері анықталды, олар бір зондтың күшін біртіндеп арттырады, сонда зерттеуші жауап қайтару кезінде байқай алады.

Термиялық анализдер

Жедел термиялық ынталандыруға сезімталдық - тірі түрлердің ауырсынуын зерттеуде қолданылатын ең көп таралған тест.[2] Зиянды жылу тітіркендіргіштерінен туындаған мінез-құлық рефлексі ауырсыну сезімталдығының және оның әртүрлі деңгейлерде төмендеуінің салыстырмалы түрде жақсы болжаушысы болып табылады. анальгетиктер. Термиялық талдаулардың бір маңызды шектеулері жануарлардың ауырсыну моделі ретінде нәтижелерінің ерекшелігі мен дұрыстығында жатыр.[2] Функционалды механика туралы өте аз мәлімет бар ноцептивті афференттер murine тақырыптар, сондықтан осы жануарлардан адамдарға байқалған кез-келген ауырсыну реакциясын аудару күмән тудырады.[2]

Құйрықты алып тастау

Ауыр сезімталдықты сынау кезінде құйрықты алып тастаудың екі нұсқасы қолданылады.[2] Классикалық сәулеленетін жылу сынағында жылу көзі құйрықтың кішкене аймағына бағытталады және жылу көзінен құйрықты шығарып алудың кешігуі өлшенеді. Иммерсиялық сынауда сұйық ыдысты ноцицептивті температураға дейін қыздырады немесе салқындатады - қалыпты жағдайда 50-55 ° C немесе 0 ° C-тан төмен. Содан кейін жануар затын сұйықтыққа батырылған құйрығымен орналастырады және сұйықтықтан құйрықты алудың кешігуін өлшейді.

Қолданылатын жануарлар заттары зиянды тітіркендіргіштерді бағыттау үшін қажетті дәл позицияға байланысты құйрықты алып тастау сынағын өткізген кезде өте жоғары деңгейде ұсталуы керек. Әдетте ұстамдылық заттарды кішігірім орналастыру арқылы жүзеге асырылады Плексиглас заттарды үйренуге болатын немесе өз еркімен енгізе алатын түтіктер немесе мата / картон қалталар.[2]

Термиялық ноцицепцияны сынаудың басқа түрлеріне, мысалы, ыстық тақтайша сынағы немесе Харгривс сынағына құйрықты алып тастау талдауларының басты артықшылығы - бірнеше рет жүргізілген бақылаулармен нәтижелердің салыстырмалы тұрақтылығы. Басқа сынақтардың ауырсыну-рефлекторлық кешігу бақылаулары, әдетте, құйрықты алу талдауларына қарағанда, тақырыптар бойынша да, тақырыптар шеңберінде де өзгереді.

Ыстық ыдыс

Негізгі мақала: Ыстық плитаны сынау
Егеуқұйрықта жасалынған ыстық плитаны талдаудың мысалы

Сияқты жылу өткізгіш беті фарфор немесе металл, а тудыратын температураға дейін қызады ноцептивті жануарлар тобындағы реакция - әдетте 50-56 ° C.[2] Содан кейін нысан бетіне қойылады және блокаданың көмегімен платформадан шығуға жол берілмейді. Ауыру-рефлекторлық мінез-құлықтың кешігу мөлшері өлшенеді.[1] Бұл талдаудың асқынуының бірі - оның қайталама тестілеуге жарамсыздығы. Бұрын ыстық тақтайша сынағына ұшыраған жануарлар мінез-құлық төзімділік құбылысын көрсетеді, бұл кешігудің төмендеуімен және сезімталдығының төмендеуімен сипатталады антоцицептивті агенттер.[1] Ыстық тақта сынағының тағы бір асқынуы - бұл мінез-құлықтағы ауырсыну реакциясын не құрайтынын анықтау; бұл лаптарды көтеру / жалау, дауыстап айту, цилиндрден шығуға тырысу және т.б.[2] Сондай-ақ, жылу тітіркендіргішін бақыланатын тәсілмен беру әр секцияның беткі қабатының әсеріне байланысты әр түрлі температураға байланысты және жануардың қозғалатын-қозғалмайтындығына байланысты қиындықтар тудырады.[2]

Құйрықты сипау

Негізгі мақала: Құйрықты сипау тесті
Құйрықты сипауға арналған дәстүрлі қондырғының мысалы

Құйрықты қағып тексеру немесе құйрықты қағып тексеру кезінде кеміргіштердің құйрығына бағытталған жоғары қарқынды жарық сәулесі қолданылады ноцепция.[1] Қалыпты кеміргіштерде жарық сәулесінен пайда болатын зиянды жылу сезімі флексор арқылы құйрықтың прототиптік қозғалысын тудырады алып тастау рефлексі.[2] Тергеуші әдетте рефлекстің пайда болу уақытын өлшейді, оған кеміргіштердің жынысы, жасы және дене салмағы әсер етеді.[1] Құйрықты шертіп талдаудың ең маңызды параметрі - сәуленің қарқындылығы; 3-4 секундтан асатын кешігуді тудыратын тітіркендіргіштер көбінесе өзгермелі нәтижелер жасайды.[6] Қарастырылатын тағы бір маңызды фактор - қолданылатын ұстамдылық деңгейі; Тығыз ұсталған кеміргіштер стресс деңгейінің жоғарылауына байланысты құйрықты жылжытудың кешігуін көрсетуі мүмкін.[6]

Харгрив

Hargreaves талдауы ауырсыну үшін құйрықты емес, артқы жаққа бағытталған жоғары қарқынды жарық сәулесін қолданады; содан кейін тергеуші жануардың артқы аяғын шығаруға кететін уақытын өлшейді.[1] Құйрықты сипап тексеруден айырмашылығы, кеміргіштер көбінесе шектелмейді нұрлы жылу көзі артқы аяққа бағытталған. Hargreaves талдауының шектік кідірісі әдетте 10 секундқа белгіленеді.[7] Бұл тесттің құйрықты сипап тексеруден басты артықшылығы - бұл дененің екі жағындағы емдеу әсерін тәуелсіз бағалауға мүмкіндік береді.[2]

Қолданбалар

Ноцицептивтік анализдердің ең көп таралған қолданылуының бірі - жаңа ауырсыну дәрі-дәрмектерінің және осыған ұқсас дәрілердің тиімділігін тексеру. Осыдан кейін дәрі-дәрмектің әртүрлі популяцияларға әсерінің айырмашылықтарын өлшеу үшін салыстырмалы тесттер жүргізуге болады, мысалы, еркектерге қарсы әйелдер немесе жастарға қартайған кезде. Сондай-ақ, бұл сынақтар ациотерапияның ноцицепцияға қатысты реакцияларын көрсетсе, кейбір зиянды ауруларды немесе ауытқуларды анықтай алады. Сонымен қатар, ноцицепцияның өзі тұқым қуалаушылықты тексеру үшін ноцицепция тесттерін қолдануға болады.[8] Сондай-ақ, «ауырсыну» жолдарының физиологиясын бағалау үшін ноцептивті талдауды қолдануға болады. Рөл капсаицин рецепторлар ауыру жолында ойнайтынын тышқандардағы рецептормен және онсыз ноцицепция талдауының нәтижелерін салыстыру арқылы өлшеді.[9] Сонымен қатар, олар басқа тестілерде бақылау субъектілерінің ноцицепцияға реакцияларының қалыпты екендігіне көз жеткізу үшін пайдалы.

Сондай-ақ қараңыз

Әдебиеттер тізімі

  1. ^ а б c г. e f ж сағ Картер, Мэтт; Шие, Дженнифер С. (2010). «Нозицепция». Неврологиядағы зерттеу әдістері жөніндегі нұсқаулық. Берлингтон, MA: Academic Press. 51-2 бет. ISBN  978-0-12-374849-2.
  2. ^ а б c г. e f ж сағ мен j к л м n Могил, Джеффри; Уилсон, Соня; Ван, сен (2001). «Мурин тақырыптарындағы ноцицепцияны бағалау». Ауырсынуды зерттеу әдістері. Неврологиядағы шекаралар. 20012652. дои:10.1201 / 9781420042566-c2. ISBN  978-0-8493-0035-6.
  3. ^ Костер, Р .; Андерсон, М .; De Beer, J. (1959). «Ауырсынуды басатын скринингке арналған сірке қышқылы». Федерация ісі. 18: 412–417.
  4. ^ Матера, Карло; Фламмини, Лиза; Квадри, Марта; Виво, Валентина; Баллабени, Вигилио; Хольцграбе, Улрике; Мор, Клаус; Де Амики, Марко; Барочелли, Элизабетта; Бертони, Симона; Dallanoce, Clelia (2014). «Мускариндік ацетилхолинді рецепторлардың бис (аммион) алкан типті агонистері: синтез, in vitro функционалды сипаттамасы және in vivo олардың анальгетикалық белсенділігін бағалау». Еуропалық дәрілік химия журналы. 75: 222–232. дои:10.1016 / j.ejmech.2014.01.032. ISSN  0223-5234. PMID  24534538.
  5. ^ Брэдман, Мэттью Дж .; Феррини, Франческо; Салио, Чиара; Мериги, Адалберто (қараша 2015). «Фон Фрей қылдарын қолданатын кеміргіштердегі практикалық механикалық шекті бағалау / Семмес-Вайнштейн монофиламенттері: ұтымды әдіске». Неврология ғылымдарының әдістері журналы. 255: 92–103. дои:10.1016 / j.jneumeth.2015.08.010. PMID  26296284. S2CID  206270382.
  6. ^ а б Бэннон, Энтони В .; Мальмберг, Анника Б. (2007). «Ноцицепция модельдері: кеміргіштердегі ыстық плиталар, құйрықтарды қағу және формалин сынақтары». Нозицепцияның модельдері: кеміргіштердегі ыстық, табақша, құйрық, жылжу және формалин сынақтары.. Неврологиядағы қолданыстағы хаттамалар. 8 тарау. 8.9 б. дои:10.1002 / 0471142301.ns0809s41. ISBN  978-0-471-14230-0. PMID  18428666. S2CID  19332207.
  7. ^ Варнадо-Родос, Ю; Гюнтер, Дж; Терман, GW; Чавкин, С (2000). «Екі опиоидты анальгезия және тінтуірдің екі штаммындағы анальгетикалық төзімділік: C57BL / 6 және 129 / SvJ». Батыс фармакология қоғамының еңбектері. 43: 15–7. PMID  11056944.
  8. ^ Ларивьере, Уильям Р; Уилсон, Соня Дж; Лауфлин, Тина М; Кокайеф, Анна; Батыс, Эрин Е; Адхикари, Seetal M; Уан, сен; Могил, Джеффри С (2002). «Ноцицепцияның тұқым қуалаушылық. III. Ноцицепция мен жоғары сезімталдықтың жиі қолданылатын талдауларының арасындағы генетикалық қатынастар». Ауырсыну. 97 (1–2): 75–86. дои:10.1016 / S0304-3959 (01) 00492-4. PMID  12031781. S2CID  17419719.
  9. ^ Катерина, Дж .; Леффлер, А; Мальмберг, АБ; Мартин, WJ; Трафтон, Дж; Петерсен-Цейц, КР; Кольценбург, М; Басбаум, АИ; Джулиус, Д (2000). «Капсаицин рецепторы жетіспейтін тышқандардағы ноцицепция мен ауыру сезімі бұзылған». Ғылым. 288 (5464): 306–13. Бибкод:2000Sci ... 288..306C. дои:10.1126 / ғылым.288.5464.306. PMID  10764638.

Сыртқы сілтемелер

  • Ларивьере, Уильям Р; Уилсон, Соня Дж; Лауфлин, Тина М; Кокайеф, Анна; Батыс, Эрин Е; Адхикари, Seetal M; Уан, сен; Могил, Джеффри С (2002). «Ноцицепцияның тұқым қуалаушылық. III. Ноцицепция мен жоғары сезімталдықтың жиі қолданылатын талдауларының арасындағы генетикалық қатынастар». Ауырсыну. 97 (1–2): 75–86. дои:10.1016 / S0304-3959 (01) 00492-4. PMID  12031781. S2CID  17419719.
  • Ле Барс, Даниэль; Гозариу, Мануэла; Кадден, Самуил В. (2001). «Жануарлардың ноцицепция модельдері». Фармакологиялық шолулар. 53 (4): 597–652. PMID  11734620.
  • Уилсон, Соня Г .; Могил, Джеффри С. (2001). «Тышқанның (нокаутпен) ауырсынуын өлшеу: кішкентай сүтқоректілердегі үлкен қиындықтар». Мінез-құлықты зерттеу. 125 (1–2): 65–73. дои:10.1016 / S0166-4328 (01) 00281-9. PMID  11682095. S2CID  2556160.
  • Рао, Тадимети С .; Корреа, Люсия Д .; Рейд, Ричард Т .; Ллойд, Г.Кеннет (1996). «Егеуқұйрық-фликт талдауындағы нейрондық никотиндік ацетилхолинді рецепторлардың (NAChR) лигандтарының анти-ноцицептивті әсерін бағалау». Нейрофармакология. 35 (4): 393–405. дои:10.1016/0028-3908(96)00013-5. PMID  8793901. S2CID  20153440.
  • Шюрен, Н .; Нойперт, В .; Ионак М .; Нойхубер, В .; Бруне, К .; Гейслингер, Г. (1997). «Перифериялық зиянды стимуляция егеуқұйрықтың формалинді талдауының бірінші фазасында жұлын PGE2 бөледі». Өмір туралы ғылымдар. 60 (21): 295–300. дои:10.1016 / S0024-3205 (97) 00155-0. PMID  9155004.
  • Йоханссон, Р.С .; Валлбо, Å.Б .; Вестлинг, Г. (1980). «Фон Фрей түктерімен өлшенген адамның қолындағы механосенсивті афференттің табалдырықтары». Миды зерттеу. 184 (2): 343–51. CiteSeerX  10.1.1.572.181. дои:10.1016/0006-8993(80)90803-3. PMID  7353160. S2CID  37354867.
  • Леччи, Алессандро; Джулиани, Сандро; Патаччини, Риккардо; Вити, Джованни; Магги, Карло Альберто (1991). «Термоцицепциядағы NK1 тахикинин рецепторларының рөлі: (±) -CP 96,345, пептидті емес P антагонистері, тышқандардағы ыстық тақта сынағына әсері». Неврология туралы хаттар. 129 (2): 299–302. дои:10.1016 / 0304-3940 (91) 90485-C. PMID  1720881. S2CID  20529870.